Мазок ПЦР у женщин: как готовиться, как берут ПЦР у женщин.

Мед.Консультант Анализы ПЦР анализ — преимущества, расшифровка и описание метода

Впервые об анализе методом ПЦР заговорили в 1983 году. Данная методика была разработана Кэри Мюллисом и сотрудниками его лаборатории. С тех пор популярность исследования неуклонно возрастает, т.к. оно обладает существенным рядом преимуществ перед другими методиками.

На сегодняшний день ПЦР диагностика является эталоном или стандартом в выявлении инфекций и возбудителей заболеваний, особенно протекающих бессимптомно. В первую очередь это доклиническая диагностика.

• Преимущества ПЦР-диагностики
• Анализ ПЦР на инфекции
• Подготовка к сдаче анализа
• Расшифровка результата ПЦР
• Насколько точна ПЦР-диагностика?

ПЦР анализ, что это такое?

Проведение анализа в ПЦР машине
Сущность ПЦР анализа заключается в том, что в пробирке клонируются (многократно увеличиваются) последовательности нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), характерных для определенного вида возбудителей.

Аббревиатура ПЦР расшифровывается как — полимеразно цепная реакция.

Главная отличительная черта данного метода – это амплификация, т.е. создание огромного числа копий необходимого гена или его фрагмента. Все это производится вне организма, т.е. в пробирке.

Так, если проведено 20 циклов ПЦР, то получается примерно 1 миллион копий и более. Это позволяет обнаружить инфекцию даже при её незначительном количестве в исходном материале, когда другие методы анализа бессильны. Это определяет высокую чувствительность данного метода.

Простыми словами можно провести такую аналогию — одну маленькую песчинку на полу вы не заметите, но после увеличения количества песчинок в миллион раз (проведение ПЦР), кучка песка уже будет хорошо видна.

Плюсы и минусы ПЦР

При отражении плюсов ПЦР следует отметить:

• чувствительность. Как говорилось выше, даже единичный агент, оставленный возбудителем, позволяет обнаружить инфекцию на ее ранней стадии или если она протекает скрытно;
• широкий спектр. Например, ПЦР 6 позволяет 1 исследованием выявить целых 6 возбудителей;
• точность. Ложные результаты при данном методе исследования имеют место быть, но их количество сведено к минимуму;
• скорость. Как правило, пациент уже на следующий день может забрать готовый результат ПЦР исследования.

• стоимость. ПЦР-исследование не включено в список исследований в системе ОМС. Дорогое высокоточное оборудование требует оплаты своей работы;
• требования к соблюдению техники исследования и к профессионализму сотрудников;
• требования к подготовке.

Преимущества ПЦР-диагностики

Основными преимуществами анализа на инфекции ПЦР-методом являются:

• наиболее высокая чувствительность и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов;
• возможность выявления микроорганизмов в разнообразных биологических материалах (кровь, моча, влагалищный секрет, слюна и т.д.);
• возможность выявить одновременно несколько причинных микроорганизмов, если таковое наблюдается. Для сравнения — использование бактериологических методов не дает такой возможности, т.к. необходимо применение различных сред для выращивания различных болезнетворных микробов;
• возможность транспортировки биологического материала, т.к. для выявления возбудителя не обязательно сохранять его в живом виде;
• скоростьвыполнения анализа;
• точность проводимой этиологической диагностики;
• возможность количественного определения возбудителей — особенно актуально для условно-патогенных микробов, которые только по достижении определенной концентрации способны вызывать заболевание;
• способность контролировать течение инфекционного процесса при проведении лечения.

Достоверность ПЦР-метода

Для оценки эффективности методики есть три критерия:

— Точность

– выявление инфекции (или ее отсутствия) с высокой степенью вероятности.

— Специфичность

– точность определения конкретного возбудителя.

— Чувствительность

– возможность идентификации возбудителя даже при малом количестве генетического материала в биологических образцах.

При использовании метода ПЦР получение ложноположительных результатов практически невозможно (то есть, если возбудитель отсутствует, то положительной проба не будет).

Ложноотрицательный результат возможен, но такое происходит довольно редко. Подобные ситуации возникают, если инфекция на момент исследования неактивна. К примеру, хроническая инфекция вне активности или же латентная инфекция.

Анализ ПЦР на инфекции

В настоящее время методом полимерзной цепной реакции определяют большинство половых (и других) инфекционных заболеваний. Диагностика получила широкое распространение за счет своей высокой чувствительности и специфичности.

Особенно большой популярностью пользуется анализ ПЦР на хламидии.

Это связано с тем, что данные микроорганизмы обитают внутриклеточно, что создает определенные трудности в их обнаружении.
ПЦР-диагностика позволяет выявлять даже минимальное количество хламидий, которые, как правило, еще не приводят к появлению клинических симптомов. Даже наличие только 2 молекул нуклеиновых кислот в исследуемом материале позволяет выявить причинную инфекцию.

А это залог успешного лечения, которое начинается еще на доклиническом этапе.

Также производится определение инфекций:

• ВИЧ;
• вирусные гепатиты;
• туберкулез;
• клещевой энцефалит;
• различные венерические заболевания и т.д.

ПЦР-диагностика позволяет решать и ряд других важных задач:

• мониторинг терапии и оценка ее эффективности;
• определение «нагрузки вирусами», на основании которой производится индивидуальный подбор дозы препарата;
• выявление штаммов микроорганизмов, отличающихся фармакологической устойчивостью (нечувствительностью к лекарственным препаратам).

Подготовка и забор материала

Для диагностики урогенитальных инфекций подходят следующие биоматериалы:

• Мазок (соскоб эпителия) из уретры;
• Сок простаты;
• Сперма;
• Кровь (при анализе на цитомегаловирус, гепатиты, герпес, ВИЧ);
• Моча.

При признаках мочеполовых инфекций и на профилактических осмотрах чаще всего для исследования берут мазок из уретры. Для сохранения всей присутствующей на ее стенках микрофлоры за двое суток следует воздержаться от секса, за 3-4 часа не мочиться. За 2-3 дня нужно воздержаться от приема алкоголя, острых, копченых, соленых блюд (чтобы не раздражать стенки мочевого пузыря и уретру).

Процесс забора мазка из уретры может быть неприятным, но терпимым. Остаточные явления в виде болей при мочеиспускании проходят сами в течение двух дней

Процесс взятия соскоба болезненный, поскольку на конце тонкого зонда, вводимого в уретру, находится щеточка, соскребающая частички внутренней выстилки (эпителия). Боль может присутствовать еще 2-4 дня, усиливаясь при мочеиспускании. Подобные симптомы возникают далеко не у всех мужчин, но жалуются многие. Ослабить неприятные ощущения можно при помощи геля «Катеджель».

Подготовка к сдаче анализа

Целенаправленно готовиться к сдаче анализа, который будет проводиться методом ПЦР, не требуется. Однако очень важно, чтобы специалист производил забор материала с соблюдением всех необходимых условий стерильности.

Так, например, для взятия крови следует применять специальные вакуумные системы, для взятия секрета половых органов следует использовать специальные пробирки и т.д.

В некоторых случаях в лабораторию материал следует транспортировать. Чтобы это сделать правильно, необходимо герметично закрыть емкость с биологическим материалом. Это позволит предупредить проникновение туда иных микроорганизмов, обитающих во внешней среде.

Общие сведения при исследовании мочи для мужчин и женщин

Следует сдать на анализ первую мочу утром, ее среднюю порцию. Другими словами начинать мочиться следует в унитаз. Затем остановить акт мочеиспускания, подставить под уретру баночку для сбора мочи, продолжить мочиться в течении 2-3 секунд, затем снова остановить мочеиспускание и, убрав контейнер, закончить акт мочеиспускания в унитаз.

Женщинам и мужчинам перед тем как сдать ПЦР следует хорошо вымыть наружные половые органы для исключения попадания в мочу смегмы (смесь секрета сальных желез крайней плоти) и выделений из влагалища.

Баночка для мочи должна быть стерильной. Попросите контейнер в клинике, где вы сдаете анализ, либо заранее приготовьте баночку с плотно закрывающейся крышкой и прокипятите их не менее 10 минут.

Непосредственно перед сдачей ПЦР запрещено:

• мочиться (необходима самая первая порция мочи за день);
• изменять количество выпитой за сутки до исследования жидкости. Это необходимо, чтобы поддерживать обычный водно-электролитный баланс организма, в котором себя комфортно чувствует потенциальный возбудитель инфекции;
• использовать уросептики;
• применять мыло, содержащее в себе антибиотик;
• заниматься сексом за 12 часов до исследования;
• при менструации желателен забор мочи уретральным катетером для исключения попадания крови в контейнер с мочой;

Если один из пунктов был нарушен:

Следует воздержаться от проведения диагностики инфекций методом ПЦР. Если же все-таки анализ был сдан, следует его повторить через двое суток. Если при использовании антисептиков и антибиотиков результат оказался «хорошим» — не стоит радоваться. Скорее всего, при наличии определенных жалоб, это ложноположительный результат.

Ребенок болел желтушкой можно ли ему делать прививку от гепатита

Расшифровка результата ПЦР

Результаты ПЦР-анализа могут быть двух вариантов:

• положительный – возбудитель обнаружен;
• отрицательный – возбудитель не выявлен.

Следует знать — даже при отсутствии клинической симптоматики может быть получен положительный результат.

В данном случае ориентироваться необходимо на данные полимеразной реакции, т.к. она позволяет выявить заболевание на доклинической стадии.
Иногда может быть получен сомнительный ответ, когда количество выявленных копий соответствует верхней границе нормы. Чтобы уточнить причину заболевания, следует повторить анализ, уделив особое внимание условиям сбора биологического материала.

Суть методики и сфера применения

Анализ основан на принципах молекулярной биологии. Исследование методом ПЦР заключается в использовании особого фермента, что под воздействием температурных режимов, копирует РНК и ДНК присутствующих в собранном биоматериале бактерий и вирусов. Такое массовое размножение дает возможность врачу в точности определить, к какому виду принадлежит бактерия, спровоцировавшая недуг, а также измерить уровень ее концентрации в биоматериале. Проводится процедура копирования в специальном аппарате – амплификаторе, который нагревает и охлаждает пробирки с собранным материалом, создавая удобное условия для репликации.

ПЦР исследование проводят по многим причинам, но чаще всего его используют для определения наличия таких инфекционных болезней как:

• ВИЧ;
• герпес;
• половых инфекции — хламидиоз, уреаплазмоз, гарднереллез, трихомониаз;
• кандидоз;
• гепатит;
• мононуклеоз;
• листериоз;
• цитомегаловирус;
• туберкулез;
• вируса папилломы человека;
• клещевой энцефалит.

ПЦР анализ не ограничивается сферой применения в медицине, не редко скрининг делают, если необходимо понять, кому принадлежит биологический материал, найденный на месте преступления, то есть ПЦР анализ массово применяют в криминалистике. Требуется отметить, что мазок или кровь на ПЦР берут, если требуется установить отцовство. Результаты ПЦР диагностики ничем не уступают привычному анализу на ДНК родство, да и стоит намного дешевле.

Что показывает при беременности общий анализ крови?304095

Какой еще материал берут для ПЦР исследования

Врачи отдельно выделяют патологии, имеющие название экстрагенитальных. В этом случае идет речь часто о венерической патологии, что локализуется по своим симптомам не в области половых органов, а, например, в зоне ануса или ротовой полости. Естественно, в этом случае классический мазок или исследование мочи не будут иметь весомого эффекта во время исследования. Чтобы исключить экстрагенитальные патологии, могут браться образцы материала с различных зон.

Например:

• ПЦР мазок у мужчин из заднего прохода берется для оценки в том случае, если у представителя сильного пола в области ануса есть большое количество кондилом
• стоит сдать мазок со слизистой оболочки глаза при подозрении на поражение этой области одним из возбудителей
• не лишним часто бывает исследование спермы, позволяющее определить наличие в организме вяло протекающих процессов, поражающих глубокие части мочеполовой системы
• мазок из ротовой полости сдается в том случае, если практиковался оральный секс, и есть подозрение на развитие оральной формы заболевания

В ряде случаев рекомендовано выполнение ПЦР секрета простаты у мужчин. Исследование позволяет выявить бактериальный, вирусный или грибковый простатит, установить возбудителя заболевания, дать рекомендации по терапии патологического процесса.